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一、預期用途
定性檢測並區分鼻拭子標本中的甲、乙型流感病毒抗原，通過目視的結果來輔助診斷甲、乙型流感病毒感染。
二、簡介量
流行性感冒（通常簡稱為「流感」）是具有高度傳染性的急性病毒性呼吸道感染。通過咳嗽或打噴嚏時排出的帶有活病毒的氣溶膠，很容易在人與人之間傳播。每年的秋季和冬季都可爆發流感。甲型流感病毒的流行性比乙型流感病毒的流行性要強，並且大多數嚴重的流感也都是由它引起的，而乙型流感則相對比較緩和。
實驗室診斷的金標準是14天的細胞培養，並有一種細胞系能夠支持流感病毒的生長1。細胞培養的臨床應用有限，因為結果相對於臨床上有效的治療太晚了。RT-PCR是一個較新的方法並且比培養更敏感，其檢測率比培養法提高了2-23%2。但是，RT-PCR檢測昂貴、複雜，且必須在專業的實驗室里進行操作。
三、檢測原理
廣州市宜康生物甲/乙型流感準確檢測試驗是應用夾心免疫試驗技術檢測甲/乙型流感抗原的薄膜免疫層析技術。本測試條的膜上有單獨的區域分別固定有特異性的甲型和乙型流感單克隆抗體和有色金結合物，後者也是由特異的甲型和乙型流感抗體組成。
拭子標本需要一個標本製備步驟，即將拭子上的樣本洗脫到提取液中（R1）。然後將檢測條放入提取液中。
15分鐘時，根據在甲/乙型流感檢測區域是否存在紅色/粉色線條來判讀檢測結果。對於一個有效的檢測，其對照區應可見一條紅色/粉色的對照線。
四、試劑成分和儲存
10人份裝試劑：每個密封的錫箔袋裡含1個檢測條，1個含有溶解粘液試劑的提取管和1包幹燥劑。
1×4ml R1：拭子提取液（含去污劑的緩衝鹽溶液）。
10份鼻拭子。
1個紙板工作檯
1個甲型流感陽性/乙型流感陰性的對照拭子：拭子上乾燥有滅活的甲型流感病毒。
1個乙型流感陽性/甲型流感陰性的對照拭子：拭子上乾燥有滅活的乙型流感病毒。
說明書和操作卡
檢測盒可以冷藏，也可在20-30℃的常溫保存至有效期。不要使用超過有效期的試劑。
五、自備材料
時鐘、計時器和秒表
六、注意事項
不要將不同試劑盒中的成分混和使用。
不要使用過期的試劑盒。
不要重複使用檢測條。
不要使用變潮或包裝損壞的檢測條。
只使用試劑盒內提供的拭子。
整個過程均應遵守處理感染性或化學試劑的標準規則。所有污染的廢棄物如拭子、檢測條和提取物，均應按照生物危廢棄物來處理。
須嚴格按照說明書來操作，以確保獲得準確的結果。
適用歐盟導則的成分危害信息如下：
－拭子提取試劑（R1）- 有害：含有疊氮鈉R22，吞服有害。S60及其容器必須按危害物處理。
-提取管-提取管含有Tris（2-羧基乙基）-膦鹽酸鹽（歸類為腐蝕劑）
R34可造成灼傷，S26如與眼睛接觸，立即用大量清水沖洗，並去看醫生。
（註：提取管沒有貼標籤的要求，因為它是一種形式，當按說明使用時沒有危害）
-檢測條-應專業用戶要求的安全數據表
所有標本-污染品應按照生物危險品處理規定處理。
七、標本採集與儲存
· 在目視下，將拭子插入出現分泌物的鼻孔中。
· 輕輕旋轉著拭子，直至鼻甲骨處碰到阻礙（插入鼻孔中不足1英寸）。
· 沿著鼻腔壁旋轉拭子三次。
建議：樣本採集後儘快處理。如果不立即處理，應將拭子放入乾燥、無菌的密封塑料管中保存。拭子最多可以在常溫下乾燥保存48小時。
八、檢測步驟
試劑如果冷藏，在打開之前須將其放置20-30℃的常溫，以避免潮氣凝在膜上。病人樣本和對照品在檢測前也要達到室溫。
複閱標本採集指南。
準備檢測前再打開錫箔袋。
1、打開包裝袋取出檢測條。
2、將提取管放在工作檯上。將拭子提取液瓶（R1）垂直向下，擠壓瓶子使溶液自由滴進提取管中而不接觸管子邊緣，向提取管加入6滴R1。
3、將拭子標本放入提取管，旋轉拭子大約10秒，同時將拭子頭壓向管壁以釋放拭子中的抗原。
4、邊擠壓拭子頭邊將拭子取出，這樣可以儘可能多地排出拭子中的液體。按照生物危害垃圾處理方法來處理拭子。
5．將檢測條按箭頭方向插入到提取管中，並啟計時器。
6．15分鐘內讀取結果。強陽性結果在15分鐘內就可報告，但是，對陰性結果必須滿15分鐘才可報告，20分鐘後的結果不再有效。
九、結果解釋
線的顏色強度有多種，不管強度如何都應解釋做有線條存在，線條的顏色和強度因樣品而異。
甲型、乙型流感線和對照線位於檢測條的兩邊，分別用「A」、「B」、「C」表示，請參見圖示。
1. 陽性（+）
1） 甲型流感（A）陽性：在甲型流感（A） 區和對照區（C）.出現紅色、粉紅色條帶。
2） 乙型流感（B）陽性：在乙型流感（B） 區和對照區（C）.出現紅色、粉紅色條帶。
3）甲、乙型流感陽性：出現3條紅色/粉紅色線 – 「A」區一條，「B」區一條，「C」對照區一條。
2. 陰性（-）
1） 甲型流感（A）陰性：在對照區（C）.出現紅色、粉紅色條帶，甲型流感（A） 區未出現紅色、粉紅色條帶。
2） 乙型流感（B）陰性：在對照區（C）.出現紅色、粉紅色條帶，乙型流感（B） 區未出現紅色、粉紅色條帶。
3. 無效（重新試驗）
如果對照區（C）未出現紅色/粉紅色條帶，即使在甲型流感（A）或在乙型流感（B） 區出現紅色/粉紅色條帶，結果是無效的，應使用新的試紙條重複試驗。
4、注意事項：
①抓緊試劑瓶（R1）並使瓶口垂直向下，擠壓試劑瓶，在保證不接觸管壁的情況下將溶液滴入管底。
② 轉動拭子時應將拭子頭抵著管內壁。
③ 用拇指和食指從管外壁擠壓拭子頭將樣品儘量擠出，然後將拭子丟棄。
④ 按箭頭方向將測試紙條插入溶液中讓其充分反應。
15分鐘後觀察顯色區，根據紅/粉紅色線的有無判斷結果，如果15分鐘內在流感（A或B） 區和對照區（C）出現紅色/粉紅色條帶，可以判斷陽性結果，但反應時間不能超過20分鐘。
5、質控
甲乙型流感準確試驗的檢測試劑中含有程式對照，「C」對照區出現的線條可保證檢測步驟是正確的，使用的液體試劑量是足夠的，且產生了毛細流動。如果15分鐘內未出現對照線試驗無效。
良好實驗室操作規範建議使用對照品。用戶要按照國家和地方的相應規定、權威組織或實驗室標準質量控制程序來運行外部質量控制。
6、對照拭子
對照拭子含有乾燥滅活的病毒，要按病人拭子標本進行處理。在第1步檢測後，按照生物危險品處置措施丟棄用過的拭子。
結果解釋見「試驗結果解釋」。如果對照品與預期不符，不要對試驗結果進行解釋，重新進行檢測或與當地供貨商聯繫。
十、試驗的局限性
· 試驗的準確性取決於拭子樣品的質量。樣品採集或貯存不當可產生假陰性結果。
· 使用高濃度的非處方或處方的鼻噴劑可對結果產生干擾，導致試驗結果無效或不正確。
· 甲型和/或乙型流感結果陽性不能排除有其他病原的混合感染，因此，要考慮到有細菌感染的可能性。
· 對所有診斷試驗，不應根據單次檢測的結果做出最終的臨床診斷，而應由醫生根據臨床和實驗室結果做出最終判斷。
十一、預期值
流感在南半球和北半球的季節性爆發造成了疾病在冬季的廣泛性傳播。據估計，在1989年和1998年間，流感及其併發症每冬可造成107，000歐洲人死亡3，每年可造成約36,000美國人死亡4。據估計，每年有10-20%的美國居民感染流感，其中有114,000人因流感樣疾病接受住院治療。流感試驗中的陽性結果數與許多因素有關，包括標本採集方法，使用的試驗方法、地理位置和特定區域的疾病流行情況。
準確性
甲/乙型流感準確試驗和RT-PCR進行了一個多中心的評估研究。從有流感症狀的成人和兒童病人採集鼻拭子，一個用於廣州市宜康生物甲/乙型流感準確試驗，一個用於RT-PCR分析。
表4、表5分別總結了甲型流感、乙型流感結果。根據這些數據計算出廣州市宜康生物 甲/乙型流感準確試驗的臨床敏感性、特異性和總體的準確性。
表4 甲型流感：廣州市宜康生物 甲/乙型流感準確試驗與RT-PCR的相關性
敏感性= （85 / 104）=81.7%
特異性= （129 / 131）=98.5%
總體一致性= （214 / 235）=91.1%
表5 乙型流感：Clearview 甲/乙型流感準確試驗與RT-PCR的相關性
敏感性= （39 / 44）=88.6%
特異性= （186 / 191）=97.4%
總體一致性= （225 / 235）=95.7%
【生產單位】：廣州市宜康生物科技有限公司
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